大鼠胰島β細胞瘤細胞，ATCC RIN-m5F細胞 簡介：

產(chǎn)品名稱：RIN-m5F細胞

中文名稱：大鼠β胰島素瘤細胞

來源：美國ATCC

形態(tài)特性：上皮細胞樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：該細胞是大鼠胰島細胞RIN-m的克隆，分泌胰島素及L型多巴脫羧酶，不產(chǎn)生生長激素抑制激素。

培養(yǎng)條件：RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS

傳代方法：1:3～1:6傳代，每周換液2～3次

復(fù)蘇周期：10個工作日

代數(shù)：3-5代

運送方式：聯(lián)邦快遞

安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

大鼠胰島β細胞瘤細胞，ATCC RIN-m5F細胞接收后的操作流程與注意事項

1.如果細胞為貼壁細胞，，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基，培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡，請及時實驗室，技術(shù)人員會跟進解決。

2.貼壁細胞生長緩慢：適當(dāng)提高血清濃度（zui高不能超過20%），或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)

3.生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)

  常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴(yán)格遵照無菌操作）：

1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml  0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?-2min）

2.鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让福?~8ml *培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散

3.取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存

 特別注意：（如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)）

1.收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間zui長不宜超過72小時）

2.貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育隔夜到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)

3.如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗室。